Laboratorijski Rezultati: In-situ-hibridizacija (ISH)

Sadržaj:

Laboratorijski Rezultati: In-situ-hibridizacija (ISH)
Laboratorijski Rezultati: In-situ-hibridizacija (ISH)

Video: Laboratorijski Rezultati: In-situ-hibridizacija (ISH)

Video: Laboratorijski Rezultati: In-situ-hibridizacija (ISH)
Video: Молекулярные методы идентификации микроорганизмов. ПЦР, секвенирование, МАЛДИ-ТОФ. Прямой эфир 27.05 2024, Ožujak
Anonim

Laboratorijski rezultati: In-situ-hibridizacija (ISH)

In-situ hibridizacija - poznata i kao FISH (fluorescentna in-situ hibridizacija) ili CISH (kromogena in-situ hibridizacija) - poseban je medicinsko-dijagnostički postupak u kojem se ispituje genetski materijal tjelesnih stanica ili tkiva. Ovom metodom ispitivanja promjene u ljudskom genetskom materijalu (DNA) mogu se koristiti za razjašnjavanje genetskih, zaraznih i tumorskih bolesti.

Glavno područje primjene hibridizacije na licu mjesta je daljnja dijagnostička obrada u kontekstu urođenih, genetskih bolesti, virusnih infekcija stanica i tkiva, malignih tumorskih bolesti, leukemije (zloćudne bolesti krvi i koštane srži) i malignih limfoma (malignih bolesti limfnog sustava).

navigacija

  • nastavi čitati
  • više o toj temi
  • Savjeti, preuzimanja i alati
  • Koji je laboratorijski postupak hibridizacije in situ (ISH)?
  • Kako funkcionira FISH ispit?
  • Za koje se bolesti provodi ISH pregled?

Koji je laboratorijski postupak hibridizacije in situ (ISH)?

Hibridizacija na licu mjesta poseban je medicinski dijagnostički postupak u kojem se genetski materijal tjelesnih stanica ili tkiva ispituje izravno na tim strukturama.

Osnova genetskog materijala je posebna, vrlo složena i dugolančana molekula:

"DNA" (deoksiribonukleinska kiselina)

U ljudi se genetski materijal koji se sastoji od dvolančane DNA (dvije komplementarne niti) nalazi u jezgri svih tjelesnih stanica, pri čemu sve tjelesne stanice pojedinca imaju identičan genetski materijal. Uz to, točan sastav genetskog sastava svakog pojedinca jedinstven je - usporediv s otiskom prsta, koji je također jedinstven za svaku osobu.

Iz tog se razloga naziva i genetski materijal

takozvani "genetski kod", jer je nacrt svih tjelesnih struktura osobe u ovom obliku predstavljen u šifriranom obliku, spremljen i potom također proslijeđen

Unutar staničnih jezgri tjelesnih stanica DNK je u posebnom redoslijedu poznatom kao

  • "Kromosomi" (nasljedna tijela) nazivaju se. Kromosomi se uvijek javljaju u parovima u stanicama ljudskog tijela, jedan nasljeđuje od majke, a drugi od oca. U tom smislu, sve stanice ljudskog tijela sadrže ukupno 46 kromosoma - 22 para takozvanih autosoma i jedan par takozvanih spolnih kromosoma.
  • Sami se kromosomi uglavnom sastoje od DNA, s tim da se pojedinačni dijelovi sekvence DNA nazivaju "geni", pod uvjetom da im se može dodijeliti određena funkcija s obzirom na strukturu i funkciju tijela. Zove se zbroj svih gena

    "Genom" ljudskog bića

Koristeći laboratorijski postupak hibridizacije na licu mjesta, određena područja genoma mogu se vizualizirati izravno u stanicama i tkivima. To znači da se genetski materijal (DNK) čini vidljivim izravno u jezgri stanica i konačno ispituje i procjenjuje pod mikroskopom. Naziv ovog laboratorijskog postupka izveden je iz ovog principa:

"In-situ" znači "izravno u strukturi koja se ispituje"

Kako funkcionira FISH ispit?

Sljedeće komponente potrebne su za hibridizaciju na licu mjesta:

  • prikladan materijal za ispitivanje (uzorci stanica ili tkiva),
  • odgovarajuću opremu za pripremu ISH pripravaka i
  • sustav detekcije (sustav mikroskopije) za prikaz (učiniti vidljivim) genetskog materijala u staničnim jezgrama.

Nakon što je pribavljen materijal za ispitivanje, stanični ili tkivni materijal mora se obraditi:

  • Stanični se materijal tanko širi na tanka staklena stakla (stakla za mikroskop).
  • U slučaju uzoraka tkiva, histološka tehnika pripreme koristi se za izradu uzoraka tankih presjeka, koji se također primjenjuju na stakalce mikroskopa.

Nakon ovih koraka pripreme, slijedeći korake denaturacije za dobivanje jednolančane DNA, pripravci su presvučeni tzv

"Genske sonde" - to su također denaturirane, jednolančane DNA sekvence koje se vežu za ciljne sekvence (ako su prisutne u ispitivanom materijalu) - drugim riječima: "hibridiziraju"

Kako bi se proizvodi hibridizacije mogli naknadno učiniti vidljivima za ocjenu, DNA sonde su označene ili izravno ili neizravno posebnim bojama. Što se tiče boja, postoji

  • s jedne strane fluorescentno bojenje, pri čemu se za procjenu odgovarajućih pripravaka moraju koristiti posebni fluorescentni mikroskopi. Iz tog razloga se naziva i ova metoda bojenja

    Označava fluorescenciju in situ hibridizaciju (FISH)

  • s druge strane, DNK sonde također se mogu obojiti jednostavnim kromogenima (bojama), a jednostavan svjetlosni mikroskop dovoljan je za prikazivanje i procjenu tako napravljenih pripravaka. Ova tehnika se naziva

    Kromogen in situ hibridizacija (CISH)

Za koje se bolesti provodi ISH pregled?

Glavno područje primjene hibridizacije in-situ je daljnje pojašnjenje u okviru

  • urođene, genetske bolesti,
  • Virusne infekcije stanica i tkiva,
  • maligne tumorske bolesti,
  • Leukemija (zloćudne bolesti krvi i koštane srži) također
  • maligni limfom (zloćudna bolest limfnog sustava).

Budući da se uzorci stanica ili tkiva analiziraju kao materijal za ispitivanje u hibridizaciji na licu mjesta, ovaj se laboratorijski postupak može provoditi samo u odgovarajuće opremljenim citološkim ili histološkim laboratorijskim objektima.

Za više informacija o raku, pogledajte Rak.

Preporučeno: